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流动相要点,日常检查

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新闻中心
2019/06/03 17:34
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【摘要】:
流动相相当于液相的血液,可以想象它对液相的重要程度。那么流动相都需要注意什么呢?今天我们来液相色谱使用过程中与流动相相关的一些使用和维护小细节,让初级选手避免被实验室大佬骂的狗血淋头的厄运。     01什么是流动相流动相,是液相色谱中用于携带试样以及展开或洗脱组分的液体。目前实验室最常用的反相色谱流动相,通常以水为基础,加入一定量的能与水互溶的有机极性溶剂。在多元液相色谱系统中,我们往往将流动相

流动相相当于液相的血液,可以想象它对液相的重要程度。那么流动相都需要注意什么呢?今天我们来液相色谱使用过程中与流动相相关的一些使用和维护小细节,让初级选手避免被实验室大佬骂的狗血淋头的厄运。

 

 

 

 

 01

什么是流动相

流动相,是液相色谱中用于携带试样以及展开或洗脱组分的液体。

目前实验室最常用的反相色谱流动相,通常以水为基础,加入一定量的能与水互溶的有机极性溶剂。在多元液相色谱系统中,我们往往将流动相分为水相和有机相并通过灵活调节各个流动相的比例来改进分离或调整出峰时间。

 

你的流动相是色谱纯吗?

02

流动相的“干净”与否,对于你能不能获得准确的数据以及液相会不会闹脾气至关重要。所以,我们一般要求,液相色谱所用的试剂要使用高纯度的专用试剂,比如说色谱纯试剂。一定要用HPLC级的溶剂,水也应达到HPLC级,同样也要使用高纯度的缓冲盐。

 

03

流动相的过滤和超声


通常情况下,我们会采用0.22或0.45微米滤膜进行过滤,需要注意的是,有机和无机需要分开过滤并使用对应的滤膜。如果你用无机滤膜过滤有机溶剂,那么你就可能看到膜溶解后的样子。

脱气有多种方法,如超声脱气、真空脱气、氮气脱气等。当然,最常见的还是超声脱气。

 

 

 

 

 

日常维护

04

 

 

液相色谱使用后,一定要及时进行清理。当样品测完之后,流动相,尤其是含有缓冲液的流动相不能保留在液相系统内,尤其是在停泵过夜或更长时间不用的情况下。

如果将含有缓冲盐的流动相留在色谱泵内,就可能析出盐的微细晶体,这些晶体将损坏密封环和柱塞等。因此,必须及时清洗后,再换成合适的溶剂保存。

在日常使用中,还需要注意的是,流动相最好现用现配。尤其是水相溶剂,必须及时更换。对于水相溶液来说,虽然大都经过了杀菌处理,但是细菌的生命力很顽强,在适当的温度和光照情况下,很快就会活跃起来,不及时更换就会造成滤头长毛事故。而有机相,虽然不会发生细菌污染,但是有机相容易发生聚合,瓶子里就会出现一些絮状的聚合沉淀物。

 

 

当然,除了上述问题之外,液相使用中还有很多其他细节需要注意。希望大家在日常实验中多多留意,让我们使用的仪器可以减少出故障的次数。毕竟,在实验压力很大的时候,仪器坏了真的会人崩溃的。

 

 

 

 

 

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