中国的基因治疗产业概览

目前国内从事基因疗法的公司超过100家：

细胞与基因治疗（ Cell and Gene Therapy, CGT）是一种通过基因表达、沉默或体外改造手段，在蛋白质水平进行调控的疗法。基因载体的体内递送目前常见的基因载体分为非病毒载体和病毒载体。非病毒载体包括质粒或裸露DNA（非病毒）、LNP递送系统等，但体内转染效果差、毒性大，严重制约了非病毒载体的临床转化。病毒载体则包括常用的腺病毒Adv、腺相关病毒AAV、慢病毒LV和逆转录病毒RV等载体。

最早期基因治疗曾尝试腺病毒载体（属于溶瘤病毒中的一种），但因为免疫原性过强和导入的环状DNA可能在细胞分裂中丢失，继而研究发现了腺相关病毒AAV和慢病毒LV。

AAV载体简述

AAV是一种无包膜单链DNA病毒，属于细小病毒家族，因其具有宿主范围广、非致病性、低免疫原性、长期稳定表达外源基因、良好的扩散性能和物理性质稳定等优点，被视为目前最有前途的基因治疗载体，在临床试验中得到广泛应用。

通常情况下野生型AAV不能独立复制，只有在辅助病毒（如腺病毒，单纯疱疹病毒，痘苗病毒）存在时才能进行复制（在缺乏辅助病毒的情况下，野生型AAV可以在许多类型的细胞中长期潜伏存在）。另外，AAV不与宿主细胞基因组整合，这很大程度上避免了与原癌基因相互作用的偶发性。

大多数时候，实验中用的是不需要辅助病毒的重组AAV病毒（rAAV）。重组腺相关病毒载体（rAAV）携带的蛋白衣壳与野生型AAV几乎完全相同，但衣壳内的基因组中编码病毒蛋白的部分被删除，取而代之的是治疗性转基因（transgene）。AAV基因组中唯一被保留的部分是反向末端重复序列（ITRs），它起到指导基因组的复制和病毒载体组装的作用。将编码病毒蛋白删除，一方面可以最大化重组AAV携带转基因的容量，另一方面可以减小病毒载体的免疫原性和细胞毒性。

其中，临床上使用最多的rAAV血清型包括2，5，8，9。这几种血清型基本涵盖了所有组织和脏器的特异性感染。其中rAAV2与rAAV8对于眼部视网膜的感染效果比较好，在眼科疾病的治疗中运用比较多；rAAV6对于悬浮细胞感染、免疫细胞及神经类细胞感染具有一定倾向性；而rAAV9在中枢神经系统感染中的运用非常多，具有特殊的跨血脑屏障的能力，基于rAAV9型改造的两个新型AAV血清型：rAAV-PHP.eB和rAAV-PHP.S分别对中枢神经系统和外周神经系统具有更好的嗜性。这些特点迥异的AAV血清型在各自的基因治疗领域都具有明显的优势。

尽管具有诸多优势，但AAV载体的安全性一直受到业内的关注。如高剂量用药时容易发生随机整合到宿主基因组中；当病人感染野生型AAV时，也有可能发生定点整合；任何一种血清型AAV都可能靶向一种多种器官或组织，所以有可能造成其它非靶向器官的感染，引起相应的“off-target”的副作用。要想减少这些安全隐患，首先就是通过筛选优化AAV外壳，找到靶向性好、感染性强、免疫原性低的外壳。其次是加大AAV的基础性研究，对AAV基础元件进行优化改造，解决随机插入隐患，这也是最解难的。

另外，CGT药物生产核心是病毒载体的表达生产，通常病毒载体的生产涉及上游的载体表达和下游的分离纯化。载体的生产涉及十分复杂的工艺，难度高，制备周期较长，导致了全球范围内的病毒载体GMP产能接近瓶颈。同时也是阻碍整个基因治疗行业发展的主要障碍。